- Chất thử cho nhóm máu ABO được chuẩn bị từ việc nuôi dưỡng globulin miến dịch trong ống nghiệm - những dòng tế bào tiết ra từ chuột. Chất phản ứng này được pha loãng với đệm phosphate có chứa NaCl, EDTA, bovine albumin (albumin từ bò) làm cho chất phản ứng phù hợp trong việc sử dụng trong ống nghiệm, slide, microplate.
- Kháng thể A được nhuộm màu xanh nhạt, kháng thể B được nhuộm màu vàng, kháng thể AB không được nhuộm màu. Quá trình thử nghiệm dựa trên nguyên tắc ngưng kết, khi nào có mặt kháng nguyên và kháng thể sẽ tạo ra phản ứng ngưng kết cho kết quả dương tính. Test âm tính khi không có hiện tượng ngưng kết xảy ra.